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[자연과학] Enzyme Activity의 측정(measurement)

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작성일 24-05-19 01:30

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6. 실험방법 :

① 시료를 희석하여 분당 0.02~ 0.04 범위내의 흡광도 감소를 나타내도록 Enzyme 농도를 맞춥니다. 따라서 lysozyme에 의해 쉽게 용해되는 Micrococcus lysodeikticus의 현탁액을 효소와 反應(반응)시켜 현탁액의 탁도가 감소하는 정도를 측정(測定) 함으로써 lysozyme 활성을 측정(測定) 합니다.



Enzyme Activity의 측정(測定)

1. 실험headline(제목) : Enzyme Activity의 측정(測定)

2. 실험일시 : 2009. 10. 29

3. 실험목적 : 단백질을 분리해 나가는 과정 중에 원하는 단백질이 얼마나 잘 분리 되었는가를 알아보기 위해서는 단백질의 함량과 생물학적 활성을 측정(測定) 합니다.

4. 재료 및 기구 :

① ion chromatography 실험에서 분리 과정마다 추출해낸 5 가지의 시료와 튜브

- sephadex에 계란 흰자 넣어 chromatography한 20ml (흰자여과액)
- 10ml에 TE buffer 10ml 처리 후 chromatography한 20ml (Tris 1용액)
- 10ml에 TE buffer 10ml 처리 후 chromatography한 20ml (Tris 2용액)
- 10ml에 탄산 buffer 10ml 처리 후 chromatography한 20ml (탄산 1용액)
-…(省略)

② 피펫(10㎖, 200㎕)

③ Cuvette

④ Spectrophotometer

⑤ Tris-EDTA(TE) buffer, 0.05M

⑥ Phosphate buffer, 0.1M (0.2M sodium phosphate monobasic, 0.2M sodium phosphate dibasic)

5. 실험理論(이론) 및 원리 : 달걀흰자의 lysozyme은 세균의 세포벽을 가수분해 시킵니다. 또 비활성도를 측정(測定) 하여 단백질의 분리 정도(순도)를 알아보는데, 이 과정이 바로 Enzyme Activity의 측정(測定) 입니다.

③ 0.1M phosphate buffer (0.2M sodium phosphate m


순서

설명

- 프리뷰를 참고 바랍니다. 탁도 變化(변화)는 450㎚에서의 현탁액의 흡광도를 측정(測定) 함으로써 알 수 있습니다.





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다.

② 세균현탁액과 phosphate buffer는 실온에 두고 효소액은 얼음에 보관합니다.

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